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[主观题]

简述增加外源表达蛋白在受体细胞中稳定性的途径。

答案
⑴受体细胞:是指能够摄取外源DNA,并使其稳定扩增以及表达的细胞。 ⑵不同导入原核受体细胞的方法: ①转化:把以质粒为载体,构建的重组分子导入受体细胞的方法。 ②转导:以噬菌体或真核病毒为载体构建的重组分子导入受体细胞的方法。 ③三亲本杂交:将含有重组DNA分子的供体菌,被转化的受体菌含有辅助菌,在辅助菌作用下,将供体菌导入到受体菌中。 ⑶不同导入真核受体细胞的方法: ①导入酵母中:对酵母进行转化的两种方法:a.细胞壁在CaCL2或多聚醇作用下,细胞壁具有穿透性,允许外源基因进入。b.用Li+盐进行处理,细胞能够允许外源基因进入。 ②导入植物中细胞中:主要采用致癌农杆菌制导下的以后Ti质粒为载体的,土壤杆菌诱发植物产生肿瘤进行转化的方法。 ③导入动物细胞中:a.物理、化学法b.生物法。
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