简述革兰氏染色的一般过程及机制。

染色过程:1无菌操作条件下,用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂 布均匀,固定;2用草酸铵结晶紫染色 1min,水洗去掉浮色;3用碘—碘化钾溶液媒染 1min,倾去多余溶液;4用乙醇脱色,革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色,革兰氏阴性菌被褪色而呈无色;5用番红染料复染 1min, 革兰氏阳性菌仍呈紫色,革兰氏阴性菌则呈红色。革兰氏阳性菌与阴性菌被分开。 染色机制:1革兰氏阳性菌的等电点比革兰氏阴性菌的等电点低,所带负电荷更多,与结晶紫的结合力较大,用碘—碘化钾溶液媒染后,两者的等电点均得到降低, 但革兰氏阳性菌的等电点降低得多,故与草酸铵结晶紫结合得更牢固,对乙醇脱色的抵抗力更强,草酸铵结晶紫、碘—碘化钾复合物不被乙醇提取,菌体呈紫色。而革兰氏阴性菌与草酸铵结晶紫的结合力弱,草酸铵结晶紫、碘—碘化钾复合物很容易被乙醇提取而使菌体呈无色。 2革兰氏阳性菌的脂质含量很低,肽聚糖的含量高;革兰氏阴性菌的脂质含量高,肽聚糖含量很低。用乙醇脱色时,革兰氏阴性菌的脂质被乙醇溶解,增加细菌细胞壁的孔径及其通透性,乙醇很易进入细胞内将草酸铵结晶紫、碘 —碘化钾复合物提取出来,使菌体呈现无色,革兰氏阳性菌由于脂质含量极低,而肽聚糖含量高,乙醇既是脱色剂又是脱水剂,使肽聚糖脱水缩小细胞壁的孔径,降低细胞壁的通透性,阻止乙醇分子进入细胞,草酸铵结晶紫和碘—碘化钾复合物被截留在细胞内而不被脱色,仍呈现紫色。